放射复合伤造血组织 DNA 含量检测模型

放射复合伤造血组织 DNA 含量检测模型是研究放射复合伤中的辐射使机体的物质代谢发生障碍，致使生物大分了发生一系列改变的一系列原因。细胞的核酸代谢对电离辐射极为敏感，即使很小剂量照射，也能影响 DNA 的合成代谢。但不同剂量射线对核酸代谢作用机制不同。在低剂量照射时，射线主要抑制了 DNA 的复制。

器材：

①小鼠

②钴-60γ射线

③固定板

④镊子

⑤蜡光纸

⑥匀浆器

⑦试管

试剂：

①NaOH 溶液（0.01 mol／L）

②二苯胺乙醛溶液

A. 剖鼠取脾 将经过钴-60γ射线照射的小鼠及正常对照小鼠，于照射后 48 小时或 72 小时颈椎脱臼处死，仰卧于解剖固定板上，剪开左侧腹部皮肤及肌肉，用镊子分离并取出脾脏，弃去筋膜。此时应注意观察照射小鼠与正常小鼠脾脏的差别。同时将脾脏置于蜡光纸上称重（应先将蜡光纸称重）。然后从中间部分剪下一小块脾脏组织（以 20～30 mg 为宜）作为待测样本组织称重。

B. 样本制备 将已称重的脾脏组织小块剪碎后，置于盛有 5.0 mL NaOH 溶液（0.01 mol／L）的匀浆器内匀浆。研磨时应特别小心，用力勿过猛，以防匀浆器管壁或管底损坏而使样本丢失。最后将样本转至试管内备用。

C. 呈色反应 取干燥试管若干支，编号。分别取正常小鼠、1.5 Gy 和 6.5 Gy 照射小鼠的脾脏匀浆上清液 1.0 mL 加入试管中，再加蒸馏水 1.0 mL 混合，另取 1 支试管加入 2.0 mL 蒸馏水作空白对照管，然后各管均加入 4.0 mL 二苯胺乙醛溶液，摇匀。其余呈色反应步骤同标准曲线的制作，最后将测得的光密度值从标准曲线图中查出相应的 DNA 含量。