生长激素生物测定法（大鼠体重法）

最新修订时间：2022-02-10

简介

生长激素生物测定法（大鼠体重法）是使用生长激素供试品处理实验动物，后续用以观察动物在供试品处理后的生命状态，并与注射标准品的动物进行比对。从而推断供试品毒力是否符合规定的实验方法。

材料与仪器

试剂

① 标准品溶液；

② 供试品溶液。

实验动物：

① 日龄 26~28 天，体重 60~80 g 清洁级雌性大鼠 (同性别)。

步骤

生长激素生物测定法（大鼠体重法）的基本过程可分为如下几步：

A. 标准品溶液的配制。

(1) 试验当日，取标准品，按标示效价用含 0.1% 牛血清白蛋白的 0.9% 氯化钠溶液，配制成高、低两种浓度的标准品溶液。

(2) 一般高浓度标准品溶液配成每 1 mL 含 0.1 ~0.2 U，低浓度标准品溶液配成每 1 mL 含 0.025~0.05 U，高、低两浓度比值（r）一般为 1:0.25。

(3) 标准品溶液分装成每天剂量并密封于 -15 °C 以下保存。

B. 供试品溶液的配制。

按供试品的标示效价或估计效价（AT，参照标准品溶液的配制及保存方法配制和保存。

C. 动物选择。取同一品系，相同性别，26~28 日龄，体重 60~80 g 的清洁级大鼠 32 只。

D. 动物处置。

(1) 摘除垂体：试验前 2~3 周手术摘除垂体，手术后于清洁级以上动物室饲养使其恢复。

(2) 称重分组：取去垂体手术后 2~3 周，体重变化小于手术前 ± 10% 的大鼠，按体重均匀分成 4 组，每组至少 8 只，织编号并记录体重。

E. 注射分别自颈部皮下注射一种浓度的标准品溶液或供试品溶液 0.5 mL，每日 1 次，连续 6 日。

F. 尸检在最后一次给药后 24 小时，处死大鼠，称重，必要时实验结束后可进行尸检，切开蝶鞍区，肉眼检查有无垂体残留，剔除有垂体残存的大鼠。

注意事项

A. 每只动物给药后体重增加的克数作为反应值。

B. 供试品与标准品各剂量组所致反应的平均值应相当，低剂量组应较正常动物体重有明显的增加，剂量组体重增加不致达极限。

C. 参照生物检定统计法中的反应平行线测定法计算效价及实验误差。本法信限奉 FL (%) 不得大 50%。

来源：丁香实验