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吸附自喉疫苗效价测定法

相关实验:疫苗效价测定法检定药品生物制品成品实验

最新修订时间:

简介

吸附白喉疫苗效价测定法是用白喉毒素处理豚鼠,攻击后观察,根据第 5 日存活率的剂反应曲线与对照组的豚鼠进行比对,从而推断供试品效价的实验方法。

材料与仪器

试剂:

① 胜理氯化钠溶液;

② 白喉毒素标准品。

实验动物:


① 体重 250~350 g 清洁级豚鼠。

步骤

吸附自喉疫苗效价测定法的基本过程可分为如下几步:

A. 标准品溶液制备。

(1) 用胜理氯化钠溶液按等比间隔将白喉毒素标准品稀释成 3~5 个稀释度。

(2) 居中的稀释度必须在攻毒后能保护约半数动物。

B. 供试品溶液制备。

(1) 用胜理氯化钠溶液按等比间隔将供试品稀释成 3~5 个稀释度。

(2) 居中的稀释度必须在攻毒后能保护约半数动物。

C. 动物选择。取一定数量的体重 250~ 350 g 清洁级豚鼠(同性别或雌雄各半)。

D. 动物处置。

(1) 免疫:用稀释后的白喉毒素标准品溶液和供试品溶液分别免疫体重 250~350 g 同性别或雌雄各半豚鼠;每个稀释度至少免疫 10 只豚鼠,另取 5 只豚鼠不免疫,作为对照组。

(2) 攻击:免疫 4 周后,每只免疫豚鼠皮下注射 100LD50。白喉毒素 1.0 mL;对照组豚鼠注射经 100 倍稀释的上述毒素,每只皮下注射 1.0 mL。

E. 观察攻击后观察 5 天,每日记录动物死亡情况。根据第 5 日存活率,以标准品的效价为标准,平行线法计算供试品效价。95% 可信限应在效价的 50%~200%,否则 95% 可信限的低限应大于相应品种中要求的效价规格。

注意事项

A. 供试品的最低稀释度能保护半数以上动物。

B. 供试品的最高稀释度能保护半数以下动物。

C. 供试品和标准品的剂量反应曲线在平行性及直线性上的差异无显著意义。

D. 对照组动物应部分死亡而不全部死亡。具备以上条件则试验结果成立。

来源:丁香实验

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