急性脑血栓动物模型

急性脑血栓动物模型，是采用绿光光照诱导建立大鼠脑血栓模型，这种光化学诱导大脑中动脉血栓形成的机制主要是四燠四氯荧光素钠（虎红 B) 在绿色单光作用下产生并释放单态氧，使血管内皮细胞膜上的多种不饱和脂肪酸发生脂质过氧化，不仅使细胞膜的通透性改变，Ca²⁺内流增加，而且可促进血小板聚集与黏附，血栓形成。血过程活化产生大量血管活性物质及神经毒性物质，破坏脑细胞及血脑屏障，同时光化学诱导大脑中动脉闭塞导致脑组织缺血性损坏。

急性脑血栓动物模型的基本原理是采用绿光光照诱导建立大鼠脑血栓模型，这种光化学诱导大脑中动脉血栓形成的机制主要是四燠四氯荧光素钠（虎红 B) 在绿色单光作用下产生并释放单态氧，使血管内皮细胞膜上的多种不饱和脂肪酸发生脂质过氧化，不仅使细胞膜的通透性改变，Ca²⁺内流增加，而且可促进血小板聚集与黏附，血栓形成。血过程活化产生大量血管活性物质及神经毒性物质，破坏脑细胞及血脑屏障，同时光化学诱导大脑中动脉闭塞导致脑组织缺血性损坏。

器材：

手术剪等器材、牙科钻。

试剂：

①戊巴比妥钠 ;

【急性脑血栓动物模型】的基本过程可分为如下几步：

选用 SD 雌性大鼠，体重 250-300 g, 12 周龄。 1% 戊巴比妥钠 (30 mg/kg) 腹腔注射麻醉动物，经左侧颈部入路，在实验鼠的左耳至左限外眦连线近眼外眦 l/3 处做一垂直的长约 2 cm 的弧形切口，分离颞肌，拉开下颌关节，于卵圆孔前上方用牙科钻做一直径约为 5 mm 的骨窗，切开硬脑膜可见大脑中动脉 (MCA)。选择 MCA 起始部，经股静脉注入光敏剂， 1.5% 四碘四氯荧光素钠 (2 mL/kg),5 分钟后持续光照 10 分钟；再将光纤移至嗅束至大脑下静脉段的 MCA 血管表面，再注入半量的四碘四氯荧光素钠，持续照射 10 分钟、光照结束后，依次缝合肌肉及皮肤，模型制作完毕，单笼饲养。观察指标：

1.神经行为学检测： 造模后 0.5 天、 1 天、 2 天、 5 天，根据 Berdson 评分分级法，分别观察其神经和行为变化。

(1) 动物一般情况差，活动减少，蜷曲为 1 分；

(2) 将动物置于平面 ，推其双肩，使其向对侧移动。如双侧阻力对等且有力记 0 分，不对称则根据轻、中、重不同和度分别记为 1 分、 2 分、 3 分；

(3) 提鼠尾，使其前肢伸展爬行，观察两肢屈曲情况，如腕屈曲，肘屈曲，肩内旋，每出现一项记 1 分，三项均出现记 3 分；

2. 将鼠置笼壁上, 向后拉，观察其两前肢抓握笼壁能力大小，从而判定两前肢的肌张力，若双侧肌张力对等且有力为 0，若不对称，根据手术对侧前肢肌张力下降程度轻、中、重记为 1 分、 2 分、3 分。

3. 观察动物有无自发不停地向一侧转圈运动．出现者记 2 分。以上 4 项满分 12 分，分数越高，则损伤越重。

4. 病理形态学改变（光镜和电镜）： 于造模后 1 天断头取脑，迅速进行肉眼观察后，去除嗅脑、小脑、低位脑仁在视交叉前后等分间隔 2 mm 连续做 6 个脑冠状切片，将其放入提前预热的 37 °C，2% TTC 生理盐水溶液中，保温 15 分钟后翻片、染色 30 分钟，染色后白色区域为脑梗死部，脑片再浸入 10% 甲醛固定，石蜡包埋， HE 染色光镜观察。 造模后 1 天时，先在实验侧脑表面滴加 4% 戊二醛固定液后，于顶叶质病灶部取 1 mm³ 脑组织，浸泡电镜固定液中、制备超薄切片，在透射电镜下观察脑组织超微结构的改变。