简介
急性肺血栓栓塞症动物模型,是静脉注射胶原蛋白与肾上腺素的混合血栓诱导剂,可致动物血液黏度增加,并处于应激状态,促使肺血栓形成;或将自体血加凝血酶后形成的纤维蛋白原制备的自体血栓,由股静脉输入,可致急性肺栓塞,临床上称肺血栓栓塞症。
原理
急性肺血栓栓塞症动物模型的基本原理是静脉注射胶原蛋白与肾上腺素的混合血栓诱导剂,可致动物血液黏度增加,并处于应激状态,促使肺血栓形成;或将自体血加凝血酶后形成的纤维蛋白原制备的自体血栓,由股静脉输入,可致急性肺栓塞,临床上称肺血栓栓塞症。
用途
急性肺血栓栓塞症动物模型可用于探讨急性肺血栓栓塞症发病机制研究及其防治措施和药物疗效的评价研究。
材料与仪器
器材:
① 注射器
② 导管
③ 采血针
④ 手术器材等
试剂:
① 戊巴比妥钠
② 磺酒乙醇
③ 生理盐水
步骤
【急性肺血栓栓塞症动物模型】的基本过程可分为如下几步:
A. 小鼠 PET 模型:尾静脉注射胶原蛋白(每只 225 µg) 与肾上腺素(每只 9 µg) 的混合诱导剂,注射后观察 5 分钟内小鼠死亡数。
B. 家兔 PET 模型: 体重 2.5~3.0 kg。雌雄不限。在无菌条件下,自耳缘静脉取血 2 mL,加入 20 U 凝血酶后于 5 mL 注射器内混匀,室温下静置过夜,形成牢固血栓。将其制成直径 2~4 mm, 长 7~10 mm 的圆柱形栓子后备用 静脉缓慢推注戊巴比妥钠 (30 mg/kg) 麻醉动物,仰卧位固定。
颈部剪毛后,磺酒乙醇局部消毒,再切开一长约 2 cm 的横向切口。暴露并切开左侧颈静脉,插入 SF 导管,深度 4~5 cm 或直至右心房,经导管注入栓子后快速推注生理盐水 5 mL 以防栓子滞留于导管或颈静脉内,栓子数量以两个为宜。结扎颈静脉并缝合切门后,持续密切观察家兔的体征变化。
观察实验所需时限后,无菌条件下麻醉家兔,打开胸腔腹腔,迅速取出肺、心脏、肝、主动脉和脂肪等器官和组织。沿其走行剥离肺动脉树,因肺组织失血变白,可很快找到注入栓,再以其为标志,区分并获取所需栓塞或非栓塞的肺动脉及其相应肺组织。
C. 犬 PET 模型:实验组在消毒平皿内预先加入胶原蛋白 20 mg, 后采犬自体静脉血 10 mL 置于消毒平皿内,并加入凝血酶 200 U, 静置 2 小时后,切成约 5 mundefined5mundefined5mm 的凝血块。将其悬浮于 10 mL 生理盐水中备用。3% 戊巴比妥钠 1 mL/kg (30 mg/kg) 肌注麻醉犬。经股静脉注入血栓,随后给予 10 mL 生理盐水快速推入,建立急性 PET 模型。
来源:丁香实验