简介
Allen 采用坠落重物撞击脊髓背侧, 首次在动物身上复制出脊髓损伤模型, 开创了脊髓损伤的标准化实验研究。
原理
【脊髓挫伤模型】的基本原理:脊髓挫伤模型的基本造模原理是研究显示, 这种致伤模型影响因素很多, 如技术熟练程度, 动物种属及年龄; 脊柱未严格固定可使每次撞击部位不一致; 撞击锤与脊髓相接触表面的形状与面积不一; 可出现撞击锤多次撞击导致的「反弹」损伤 (二次打击可致一次打击脊髓变形的 60%) 等, 从而导致动物的瘫痪程度和持续时间出现较大的差异。
材料与仪器
器材:
① 小鼠、犬、兔、大鼠
② 纹式钳
③ Impactor model-Ⅱ脊髓致伤仪
④ 砝码
试剂:
① 10% 水合氯醛 (5 ml/kg)
② 青霉素
③ 3% 戊巴比妥钠 (40 mg/kg)
步骤
脊髓挫伤模型的基本造模方法可分为如下几步:
1. 小鼠
A. 动物模型选用小鼠。
B. 10% 水合氯醛 (5 ml/kg) 腹腔注射麻醉, 以 T10 棘突为中心, 备皮, 碘伏消毒后取背部正中切口, 长约 2 cm , 依次切开皮肤、皮下组织, 显露棘突。
C. 锐性切开椎旁肌并向两侧分离, 显露 T8-L1 椎体棘突及椎板, 纹式钳小心咬除 T9-T11 棘突及全椎板。以 T10 为中心 (定位: 通过计数肋骨发现小鼠椎体棘突特点为 T9 棘突斜向尾侧,T11 斜向头侧,T10 中立), 显露直径约 9 mm 的圆形区, 应用 Impactor model-Ⅱ脊髓致伤仪, 采用改良 WD 法制备小鼠 T10 节段脊髓损伤模型。
D. 致伤瞬间, 小鼠痉挛性摆尾, 双下肢及躯体回缩扑动后双下肢瘫痪, 为造模成功标志。
E. 术后分笼饲养, 每日 2 次肌内注射青霉素 2 万 U, 每天挤压膀胱 2~4 次以协助排尿, 直至小鼠自主排尿反射恢复。
2. 其他动物
A. 主要包括犬、兔、大鼠等其他常用动物。
B. 动物用 3% 戊巴比妥钠 (40 mg/kg) 静脉或腹腔内麻醉。
C. 无菌条件下, 于动物背侧正中切开皮肤, 皮下组织。暴露预备损伤段脊髓, 固定玻璃管于暴露脊髓表面, 使撞杆轻轻接触脊髓。
D. 用一定重量砝码从预定高度沿玻璃管自由落下, 撞击撞杆, 造成脊髓分级损伤。 伤力以势能 (g*cm) 表示 (犬 500 g*cm; 兔 200 g*cm; 大鼠 100 g*cm)。
E. 术后动物分笼饲养, 可出现明显的截瘫症状, 脊髓诱发电位潜伏期延长, 波型消失或宽大畸形。
来源:丁香实验