简介
肌肉植入试验是将植入物植入实验动物的肌肉组织,对试验材料植入物与准许临床使用的对照材料植入物的生物学反应进行比较。适用于评价肌肉组织对植入材料的生物学反应。
材料与仪器
器材:
手术剪、组织剪、止血钳、拉钩、巾钳、平镊、齿镊、手术刀柄、戊巴比妥钠、洞巾、缝针、一次性口罩帽子、医用纱布、30 ml 注射器、5 ml 注射器若干、橡胶手套。
试剂:
①碘伏;
②生理盐水;
③青霉素。
步骤
肌肉植入试验的基本过程可分为如下几步:
(一)试验步骤
A 对于较大的植入样品,可用试验犬(图 10-5-17),通过切开皮肤的外科手术植入方法进行试验。较小的样品可采用套针植入法。植入样品沿肌纤维长轴方向植入肌内。采用家兔脊柱旁肌时,将 4 个试验材料样品植入每只家兔脊柱一侧肌内,应平行于脊柱,离中线 25~50 mm,各植入物间隔约 25 mm。同法在脊柱另一侧植入对照材料样品。每只动物植入方式见图 10-5-18。
B 术前剪去脊柱两侧被毛,勿损伤皮肤。去毛区域约 50 mm x 100 mm 大小。
C 戊巴比妥钠常规麻醉,碘伏消毒植入区皮肤后,在脊柱棘突线正中位置,切开动物皮肤,分离皮下脂肪(试验兔一般无皮下脂肪,试验犬、猪一般均有皮下脂肪,视具体情况而定),暴露出一侧背部肌肉,在距脊柱正中线约 2.5 cm 的位置,沿肌纤维的方向用刀口轻刺肌肉,在肌肉上刺出一小口,然后用止血钳钝性分离肌肉,形成一个肌肉囊,将无菌的样品放入此肌肉囊中,用缝线将肌肉囊闭合,防止试验材料移位或脱出。在整个植入过程中,注意观察动物出血的情况。术后加强动物护理。
(二)结果观察
A 观察实验动物一般状态,体重增长情况。试验与对照样品植入后,观察各时期动物的创口有无发红、水肿或出血以及创口愈合等情况。
B 组织学显微镜观察。观察的生物反应观察指标见表 10-5-5,表 10-5-6,数据处理方法见表 10-5-7。指标包括:纤维化/纤维囊腔和炎症程度;由组织形态学改变而确定的变性;材料/组织界面炎症细胞类型,即中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞、巨噬细胞及其他多核细胞的数量和分布;根据核碎片和(或)毛细血管壁的破裂情况确定是否存在坏死;其他指标,如材料碎片、脂肪浸润、肉芽肿等;对于多孔植入材料,定性、定量测定长入材料内的组织。肌肉植入后组织切片观察参见示例图 10-5-19,图 10-5-20,图 10-5-21。
注意事项
试验和对照样品需保持灭菌状态,植入物表面不得有损伤,植入物尺寸根据选用的肌肉群的大小来决定。较小的植入物如宽 1~3 mm,长约 10 mm 的植入物可采用套管针植入的方法,样品应制成圆形边缘,两端为光滑球面,选用家兔脊柱旁肌作为植入部位。长度大于 10 mm,直径大于 3 mm 的样品须采用外科植入的方法。可选用家兔脊柱旁肌、大鼠臀肌或家兔大腿肌作为植入部位。
来源:丁香实验