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油红 O 染色检测血管内脂质沉淀

相关实验:心血管系统组织学分析实验

最新修订时间:

简介

对于高胆固醇引起的动脉硬化模型,对主动脉或动脉窦处冷冻切片的油红 O 染色可以直观地评价血管内脂质的沉积,因此是动脉硬化相关研究中常用的染色手段。

材料与仪器

试剂:

① 油红储液(称取 0.5 g 油红粉剂,先溶于少量异丙醇中,再加入异丙醇至 100 ml,避光室温可长期保存)

② 异丙醇

③ PBS

④ 封片用 15%~30% 甘油/PBS

步骤

油红 O 染色检测血管内脂质沉淀的基本过程可分为如下几步:
 
A. 新鲜切出的冷冻片或低温保存的冷冻片室温晾干至少 30 分钟,使贴片更完全。
 
B. PBS 冲洗两次,每次 15 分钟,充分洗去包埋剂。
 
C. 同时用蒸馏水稀释油红储液,以水:油红 = 2:3 的比例稀释成 30 ml(一个立式染缸的合适体积),避光水平摇床充分溶解 20 分钟,定性滤纸过滤到染缸中继续避光,工作液需在 1 小时内使用。
 
D. 切片处理完成后,用 60% 异丙醇浸润 5 分钟。
 
E. 油红工作液染色,一般避光 10 分钟。
 
F. 重新用 60% 异丙醇浸润 5 分钟。
 
G. 流水浸洗,苏木素淡染,1~5 分钟。
 
H. 常规洗涤,甘油封片,立即观察拍照,湿盒内可于 4 ℃ 保存 1 周左右。结果示例见图 8-5-10。

来源:丁香实验

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