听性脑干反应检测

别名：auditory brainstem response，ABR

最新修订时间：2022-02-10

简介

听性脑干反应是对麻醉的小鼠进行诱发电位刺激来确定其听觉和其他生理参数的敏感性。最常用的听觉生理功能测试是听性脑干反应和圆窗反应。ABR 代表从耳蜗神经元开始通过中央听觉通路的神经元反应。圆窗测试是一种行之有效的评估耳蜗活动的方法。两种方法都需要麻醉小鼠，ABR 实验小鼠麻醉醒后可以进行重复测试，而圆窗测试是需要深度麻醉进行手术的实验，因此不能重复。实验测试过程中，像其他外科手术一样，要监控小鼠的状态，保持其体温相对恒定。临床上也可以对人进行 ABR 检测，无需麻醉只需将电极放在耳蜗附近。

原理

听性脑干反应检测的基本原理是不同的电极插入小鼠不同的皮下位置，头顶正中间和两边耳蜗后分别插入电极用来记录，然后给予小鼠适当的刺激，来自不同电极的不同信号被记录。电脑上采集的数据是多个刺激叠加产生的平均值，因为单个刺激的响应可能在小鼠自身的背景噪声中丢失。刺激叠加将增强信-噪比，当越来越多的刺激叠加，随机背景噪声信号相互抵消，叠加的刺激响应被记录。ABR 包括几个波，首先出现的反向偏移的波形是耳蜗神经活动的反应，随后出现的波被认为反映了中央听觉通路的功能，后者的波形确切的起源还没有达成共识。对猫的研究显示 ABR 波形和小鼠的记录波形相似。

材料与仪器

器材：

① 信号发生器，放大器，扬声器

② 校准设备（麦克风等）

③ 脑电波记录的针状电极

④ 生物放大器和探头

⑤ 数据采集硬件

⑥ 控制信号显示和数据采集软件

⑦ 数据分析软件／数据库应用程序

⑧ 隔音箱

⑨ 加热毯

步骤

听性脑干反应检测的基本过程可分为如下几步：

A. 对测试小鼠进行 click box 刺激检测，是否存在普赖尔反射（可选）。

B. 麻醉小鼠。

C. 将小鼠放置在隔音箱的加热毯上，针状电极插入皮下。探查电极插入颅顶；参考电极插入左耳垂下；接地电极插入右耳垂下（图 8-12-5）。

D. 小鼠放松的俯卧在恒温的加热毯上，鼻子向前，将扬声器按照校准的距离放在小鼠耳间轴的前面。

E. 记录一个短声刺激 ABR（70dB SPL）以确保 ABR 良好（用非受损小鼠）（可选）。

F. 听性脑干反应短声测试是（10 微秒的延迟时间，瞬态）从 0～85 dB SPL 内 5 dB 递减，重复刺激 256 次，42.6/s。

G. 听性脑干反应测试将记录到以下频率和水平，6 kHz（0～95 dB 的声压级），12 kHz（0～95 dB 的声压级），18 KHZ（0～95 dB 的声压级），24 kHz（0～95 dB 的声压级）和 30 kHz（0～95 dB 的声压级），5 dB 的间隔。短音是 5 毫秒的持续时间，1 毫秒的上升/下降时间，重复 256 次，42.6/s（可选的值）。短音刺激呈现出从低到高的刺激频率，特定的值开始降低声音水平。

H. 如果耳聋/听力障碍被怀疑为一个特定的突变系（例如，通过升高的阈值或在任何刺激下 ABR 没有出现波形），所有刺激呈现水平在仪器允许的情况下是靠进 95 dB SPL。

I. 记录最后短声诱发的 ABR（70dBSPL），检查在记录过程中短声诱发的反应是否有任何衰退（可选）。

注意事项

1. 如果同时需要在相同麻醉状态下进行其他测试，首先进行 ABR 测试。

2. 原始数据被上传到一个数据库中用于显示每只小鼠的波形和阈值分配（图 8-12-6），显示每个突变系每只小鼠短声刺激下频率的阈值曲线。

3. 声音系统校准在每次实验开始任选一个校准曲线。这些可用于检测随着时间的推移声音传递系统的一致性。用于传递声音的麦克风系统的校准使用带有型号 4231 校准器的 Bruel＆Kjaer PULSE 系统或其他等效的校准仪器用于高频校准，每年校准 1～2 次。

4. 测试短声 ABR 任选对 70 dB 短声的振幅响应，开始和结束进行对比以确保有没有显著的生理响应衰退。

5. ABR 阈值经过培训的熟练操作者记录每只小鼠的每个刺激阈值，之后第二位熟练操作者随机选择阈值进行检查。

来源：丁香实验