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尼氏染色法检测神经细胞功能

相关实验:神经生物学基本组织学检测实验

别名:Nissl staining

最新修订时间:

简介

用于脑石蜡或冷冻切片上尼氏小体(Nissl body)染色。Nissl 染色是以德国神经病理学家 Franz Nissl 的名字命名的。


Nissl 染色液染色后尼氏小体呈蓝紫色,常用于显示脑或脊髓的基本神经结构。Nissl 小体大而数量多,说明神经细胞合成蛋白质的功能较强;相反在神经细胞受到损伤时,Nissl 小体的数量会减少甚至消失。

材料与仪器

器材:


① 商业化染色试剂盒


② 染缸等。


试剂:

① 常规石蜡切片脱、复水梯度乙醇;

② 二甲苯。

步骤

尼氏染色法检测神经细胞功能的基本过程可分为如下几步:


A 已烘干的切片在二甲苯中脱蜡 5~10 分钟,两次。


B 移入二甲苯和纯乙醇(1:1)混合液中 5 分钟左右(如经二次二甲苯脱蜡,此步可省略)。


C 移入 100%、95%、85%、70% 乙醇中,各级为 2~5 分钟。最后经蒸馏水转入染色液。


D 甲酚紫(20~40 分钟)根据试剂使用时间来定。


D 脱水(非常关键):水 1~2 秒、75% 乙醇 5 秒,85% 乙醇 5 秒、90% 乙醇 5 秒,95% 乙醇 5 秒、100% 乙醇 1 分钟,100% 乙醇 1 分钟、100% 乙醇 1 分钟。


F 二甲苯透明(二次),共约 10 分钟。


G 封片 擦去切片周围多余二甲苯,切勿干涸,迅速滴加适量中性树胶,再加盖玻片封固,避免产生气泡。在通风橱中吹干二甲苯,封片稳定后转移到片盒中保存。


结果示例如图 8-7-10 所示。


来源:丁香实验

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