简介
SHIRPA 和形态缺陷检测本来是两个独立的检测项目,最近将两者结合起来,可以在一次检测过程中得到更多、更全面的数据,提高效率。检测的目的是查看小鼠的生理特征,以观察是否存在行为及外表形态异常。对结果的描述主要包括异常的活动力、体貌、行为和反应性。
材料与仪器
器材:
① 观察圆筒
② SHIRPA 跑动区
③ 跑动区上方的金属网格
④ 发声盒
⑤ 做翻身反射的长管
⑥ 相机及摄像机
⑦ 镊子
⑧ 尺
⑨ 用于插入口中的塑料棒
⑩ 计时器
⑪ 天平。
步骤
SHIRPA 检测实验的基本过程可分为如下几步:
A 实验开始前先让小鼠在检测室内适应 30 分钟。
B 在整个实验过程中,记录小鼠的惊叫、攻击、流涎等异常行为。
C 在整个实验过程中,记录非预期的形态特征(使用相机记录形态异常)。
D 将小鼠放入置于一个网格上的干净的观察圆筒内,观察其行动和震颤情况。
E 通过同时移动下方的网格将小鼠移动到跑动区中央位置正上方 30 cm 处,使其突然落下,观察转移惊吓性。
F 记录从落下开始的 30 秒内小鼠进入的 10 c㎡ 方格的数量,以四肢全部进入为准。
G 在小鼠在跑动区自由行动的过程中观察步态和尾巴的状态。
H 在小鼠停止的状态下,将发声盒(click box)置于小鼠上方 30 cm 处按下按钮,记录小鼠的反应,重复 3 次。
I 用并起的两根手指快速接近小鼠,记录其接触躲避反应。
J 拎起小鼠尾巴使其头向下悬于网格上方 10 cm 处,观察肢体蜷曲和四肢抓握情况。
K 将小鼠放在网格上,后肢悬空,用镊子轻轻夹一下右后肢中指,观察夹指躲避(pin escape)反应。
L 将小鼠放在网格上,从 3 个方向观察其头部外观和眼的位置、大小,观察耳、头部、背部、背侧等四个位置的毛发。
M 将小鼠紧紧抓起,逐步观察其耳朵、鼻子、胡须、嘴巴、牙齿、口水多少、四肢推力、腹腔弹性、四肢形态、爪子形态、色素沉淀、指尖形态、腹部毛发、生殖器、等体貌特征细节。
N 不放开小鼠,测量其体长和尾长,同时从尾根部向尾尖抚摸尾巴,感受可能存在的结节。
O 将小鼠放入长管,突然翻转 180°,观察小鼠的翻转反应,再向另一侧同样翻转一次。
P 将小鼠放回跑动区,重新抓起,测量体重,放回原笼。
Q 彻底清洁所有设备,晾干,进行下一只小鼠的检测。
注意事项
1.如果使用乙醇清洁设备,确保在实验开始前乙醇彻底挥发,残留的乙醇可能影响小鼠的行为性质。
2.行为学相关的表型分析检测结果的正确性很大程度上与小鼠饲养管理条件相关,确保参与该实验的人员具有良好的小鼠操作经验,了解小鼠福利,并熟悉需要检测的小鼠,以避免小鼠检测前可能存在的焦虑性。
3.绝大部分小鼠行为学研究需要年龄、性别、品系一致,因此必须确保这些参数在实验中的一致性。
4.环境因素也会影响小鼠的焦虑水平,因此需要保持最适的温度、湿度、排风强度、噪声和光照水平。确保小鼠检测前和检测时始终保持在相同的环境中,才能避免环境可能产生的异常结果。
5.因为生理和生化指标会随着一天的不同时段有所改变,所有的表型相关检测都推荐在一天的相同时间内进行。
6.连续检测多只小鼠时,前一次检测在设备上残留的气味可能会影响实验结果,因此进行下一只小鼠的检测前,一定要把跑动区所有的底、壁、尺和金属网格擦干净。在每天的实验结束后,应用水彻底清洗设备以避免细菌感染。在实验结束后打开房间的紫外线灯,同时需要确保紫外线灯不会损坏含有残留乙醇的丙烯酸酯设备。结果示例如图 8-7-2 所示。
来源:丁香实验