简介
显微测微尺包括目镜测微尺(简称目尺)和物镜测微尺(简称台尺)两个部分。可以通过观察到的尺度进行换算以测量细胞显微大小。
原理
显微测微尺测量细胞显微大小实验基本原理是通过目镜测微尺与物镜测微尺配合进行:目镜测微尺为一块置于目镜中的圆形玻片,中央有一个 5 mm 或 10 mm 长的刻度尺,可被分成 50 格或 100 格。物镜放大倍数不同,每格实际长度也随之发生变化。物镜测微尺为一载玻片,其中央为一圆形、长度为 1 mm 或 2 mm 的测微尺,被分成 100 格或 200 格,每格的实际长度是 0.01 mm。在对细胞大小进行测量时,首先需将目镜测微尺每一格实际长度用物镜测微尺加以核实,再用目镜测微尺去测定标本。换算公式:目尺每格长度(μm)= 台尺的格数/目尺的格数 x 10 μm
材料与仪器
器材:
① 培养单细胞悬液(104 个/ml)
② 吸管
③ 胶帽
④ 离心管
⑤ 酒精棉球
⑥ 酒精灯
⑦ 吸水纸
⑧ 载玻片
⑨ 盖玻片
⑩ 物镜测微尺
⑪ 目镜测微尺
⑫ 普通光学显微镜
试剂:
① 碘液
步骤
显微测微尺测量细胞显微大小实验基本过程可分为以下几步:
A. 卸下显微镜目镜的上透镜,将目尺刻度向下装在目镜的焦平面上,旋上上透镜,将目镜插入镜筒。
B. 将台尺刻度面向上放置于载物台上,低倍镜下调节焦距使物尺刻度清晰。
C. 转动目尺并移动物尺,使两尺平行并左边零线对齐,从左向右找出两尺的另一条对齐线。
D. 对两重合线之间目尺和台尺格数加以记录,按公式换算出目尺每格的实际长度。
E. 载玻片中央滴加培养细胞悬液,盖上盖玻片,从其一侧滴加碘液,用吸水纸在盖玻片另一侧吸出一部分液体,即可制成培养细胞的临时装片。
F. 取下台尺,将培养细胞临时装片放在载物台上。
G. 移动细胞临时装片并转动目尺,使目尺与欲测定的细胞直径重叠,记录目尺的格数。
注意事项
1. 单细胞悬液中的细胞应尽量分散,若细胞彼此间发生重叠,其细胞长度的测量将受到影响。
2. 在对齐台尺及目尺左边零线前,应尽量将显微镜焦距调准,将误差减少到最小。
3. 当换用放大倍数不同的物镜进行测量时,台尺对目尺每格的实际长度应重新计算。
4. 所测定的细胞应不少于 10 个,最后取其平均值。
来源:丁香实验