简介
CIK 细胞是细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cells，CIK），1991 年 Stanford 大学骨髓 移植中心的 Schmidt-Wolf 等以 IFN-Y、IL-2、CD3- mAb 以及 IL-1 共培养 PBMC，得到了一个有强大抗肿瘤活性的细胞群，命名为细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK），其达到近似疗效所需的细胞数较之 LAK 细胞约小 1—2 个数量级，而且在体内应用时完全无需联合使用重组人 IL-2，因此 CIK 细胞的临床应用前景备受瞩目。
材料与仪器
器材：离心机、37℃、5％ CO2 恒温培养箱。
试剂：
① RPMI 1640 培养液；
② 25mmol/L HEPES ;
③ 2mmol/L 左旋谷氨酰胺。
④ 100 IU/ml 青霉素
⑤ 100 μg/ml 链霉素
⑥ 50 μmol/L 2-ME
⑦ 1000 IU/ml 重组人 IFN-Y
⑧ 500 IU/ml 重组人 IL-2
⑨ 50 ng/ml CD3 单克隆抗体
步骤
CIK 细胞增殖实验的基本过程可分为如下几步：
A 以 Ficoll 密度梯度离心方法分离人 PBMC，培养体系包括：RPMI 1640、10％ 胎牛血清、25 mmol/L HEPES、2 mmol/L 左旋谷氨酰胺、100 IU/ml 青霉素、100 μg/ml 链霉素和 50 μmol/L 的 2-ME，培养温度为 37℃、5％ CO2，初始细胞浓度为 106 个/ml。
B 首先在培养体系中加入 1000 IU/ml 重组人 IFN-Y，孵育 24 小时后加入 50 ng/ml CD3 单克隆抗体、500 IU/ml 重组人 IL-2，继续孵育，
C 随后每 3 天更换培养液和 IL-2，2 周后即可得到 CIK 细胞产品，培养体系约在 30 天达到增殖极限。
来源：丁香实验
