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基于温度梯度凝胶电泳法检测突变基因

相关实验:突变基因检测实验

最新修订时间:

简介

英文名:temperature gradient gel electrophoresis, TGGE


温度梯度凝胶电泳检测突变基于部分变性的 DNA 在凝胶等多孔介质中迁移减慢的原理,通过熔解温度进行 DNA 分离。


原理


温度梯度凝胶电泳检测的基本原理是在靶 DNA 和对照正合变性-退火后,同源双链在温度梯度胶内只出现单一条带;若靶 DNA 个突变碱基,则在梯度胶中会出现靶 DNA 的同源双链,正常 DNA 的同源双链, 以及靶 DNA 与正常 DNA 每条链分别杂交得到的两种异源双链。产物中有 4 个不同的融解温度,因而会在变性胶中出现 4 条带。

材料与仪器

样本的基因组 DNA


步骤

1) 样本基因组 DNA 的提取


2) 设计引物,PCR 扩增目标 DNA 序列


3) 温度梯度凝胶电泳,进行结果分析。


来源:丁香实验

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