简介
英文名:temperature gradient gel electrophoresis, TGGE
温度梯度凝胶电泳检测突变基于部分变性的 DNA 在凝胶等多孔介质中迁移减慢的原理,通过熔解温度进行 DNA 分离。
原理
温度梯度凝胶电泳检测的基本原理是在靶 DNA 和对照正合变性-退火后,同源双链在温度梯度胶内只出现单一条带;若靶 DNA 个突变碱基,则在梯度胶中会出现靶 DNA 的同源双链,正常 DNA 的同源双链, 以及靶 DNA 与正常 DNA 每条链分别杂交得到的两种异源双链。产物中有 4 个不同的融解温度,因而会在变性胶中出现 4 条带。
材料与仪器
样本的基因组 DNA
步骤
1) 样本基因组 DNA 的提取
2) 设计引物,PCR 扩增目标 DNA 序列
3) 温度梯度凝胶电泳,进行结果分析。
来源:丁香实验