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基于变性高效液相层析法检测突变基因

相关实验:突变基因检测实验

最新修订时间:

简介

英文名:denaturing high perlormance liquid chromatograph DHPLC


变性高效液相层析方法可实现基因突变分析的高通量,自动化,且无需标记,也不用专门对样品进行纯化,特异且快速。


原理


变性高效液相层析的基本原理是检测突变时, PCR 扩增得到的相同长度的 DNA 片段,包括含有特异位点的靶 DNA 片段和作为对照的正常 DNA 片段,二者只有一个位点差异,混合退火的产物进入层析柱,目标位点相同时, 二者形成同源双链,异源双链与同源双链相比,柱内保留时间较短,出层析柱后由于经紫外吸收检测,两者所得的层析蜂型不同,由此可区分开来。


材料与仪器

样本的基因组 DNA


步骤

A. 样本基因组DNA的提取


B. 设计引物,PCR扩增目标DNA序列


C. 层析过柱子,分析峰型,进行结果分析。


来源:丁香实验

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