简介
英文名:denaturing high perlormance liquid chromatograph DHPLC
变性高效液相层析方法可实现基因突变分析的高通量,自动化,且无需标记,也不用专门对样品进行纯化,特异且快速。
原理
变性高效液相层析的基本原理是检测突变时, PCR 扩增得到的相同长度的 DNA 片段,包括含有特异位点的靶 DNA 片段和作为对照的正常 DNA 片段,二者只有一个位点差异,混合退火的产物进入层析柱,目标位点相同时, 二者形成同源双链,异源双链与同源双链相比,柱内保留时间较短,出层析柱后由于经紫外吸收检测,两者所得的层析蜂型不同,由此可区分开来。
材料与仪器
样本的基因组 DNA
步骤
A. 样本基因组DNA的提取
B. 设计引物,PCR扩增目标DNA序列
C. 层析过柱子,分析峰型,进行结果分析。
来源:丁香实验