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基于错配化学裂解法检测突变基因

相关实验:突变基因检测实验

最新修订时间:

简介

英文名:chemical cleavage of mismatch , CCM


错配化学裂解法与其他方法相比,能分析 2kb 范围内的较长片段。


原理


错配化学裂解法的基本原理是检测突变时, PCR 扩增得到的异源双链与两种错配特异性试剂孵育,其中羟胺能修饰未配对的胞嘧啶,高锰酸钾修饰未配对的胸腺嘧啶。样品接着与哌啶孵育,能在 DNA 骨架中修饰过的错配碱基处发生裂解,裂解的产物通过电泳分析,显示突变特性及其位置。


材料与仪器

样本的基因组 DNA


步骤

1) 样本基因组 DNA 的提取


2) 设计引物,PCR 扩增目标 DNA 序列,PCR 产物分别与错配特异性试剂孵育


3) 凝胶电泳分析突变特征及位置


来源:丁香实验

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