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测量葡萄糖

相关实验:α-葡糖苷的测定实验

最新修订时间:

原理

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材料与仪器

己糖激酶
三乙醇胺-HCl NaOH D-葡萄糖 ATP MgCl2 NADP 6-磷酸葡萄糖脱氢酶
分光光度计

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」


0.98 ml 的实验混合物


0.01 ml 己糖激酶


25℃ 时,于 340 nm 处吸收值上升。ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。


计算

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注意事项


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常见问题

试剂:


100 mmol/L 三乙醇胺-HCl/NaOH,pH 7.6(三乙醇胺-HCl,用 NaOH 调节)


1.0 mol/L D-葡萄糖(Mr=180.2;18 g 溶于 100 ml 水中)


0.1 mol/L ATP(二钠盐,三水合物,Mr=605.2;605 mg 溶于 10 ml 水中)


0.1 mol/L MgCl2(六水合物,Mr=203.3;203 mg 溶于 10 ml 水中)


0.01 mol/L NADP(二钠盐,Mr=787.4;79 mg 溶于 10 ml 水中)


6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH,商品为 100~500 U/mg,应该准备约 5U/0.1 ml 的稀释液)


己糖激酶(HK,约 200U/ml)

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来源:丁香实验

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