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荧光光度计法测定还原反应

相关实验:L-乳酸脱氢酶测定实验

最新修订时间:

原理



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材料与仪器

LDH 稀释溶液
磷酸钾 NADH 丙酮酸
荧光光度计

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」


1.98 ml 实验混合物


0.02 ml LDH 稀释溶液


25℃ 时,在 260 nm 激发,470 nm 处测定每分钟荧光差异。用适当浓度范围的 NADH 浓度对荧光强度的标准曲线来确定比例因子。


计算


体积活性:


特殊活性:

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注意事项

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常见问题

试剂:


0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0


0.01 mol/l NADH(71 mg 溶于10 ml H2O 中)


0.1mol/l 丙酮酸(丙酮酸钠,Mr=110;110 mg溶于10 ml H2O 中)。


LDH 原料溶液(从猪心脏提取,例如 10 mg/ml,用 0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0 稀释至 1 IU/ml)

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来源:丁香实验

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