材料与仪器
LDH 稀释溶液
磷酸钾 NADH 乳酸
分光光度计
磷酸钾 NADH 乳酸
分光光度计
步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.98 ml 实验混合物
0.02 ml LDH 稀释溶液
25℃ 时,于 340 nm 处吸收值降低。NADPH 的吸收系数 ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。
常见问题
试剂:
0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0
0.01 mol/l NADH(0.663 g 溶于10 ml 0.1 mol/l 磷酸钾,pH 7.5)
0.5 mol/l 乳酸(乳酸钠,Mr=112;560 mg 溶于10 ml 0.1 mol/l 磷酸钾,pH 7.6)
LDH 原料溶液(从猪心脏提取,如 550 IU/ml,例如10 mg/ml,用0.1 mol/l 磷酸钾 pH 7.0 稀释至 1 IU/ml)
来源:丁香实验