原理
UIP（universal immuno-enzyme polymer）法，即通用免疫酶复合物法，是 Nichirei 发明的一种新型免疫组化染色方法。其基本原理及工作流程与 EnVision 法相似，不同的是 UIP 复合物为 HRF 氨基酸-抗鼠或抗兔 IgG 复合物（N-Histofine 复合物）。因 N-Histofine 复合物相对分子质量较 EnVision 复合物相对分子质量稍小，理论上具有更强的穿透力。
材料与仪器
石蜡切片
蛋白酶 PBS H2O2 树胶 二甲苯 乙醇 特异性一抗 N-Histofine 复合物
滴管 玻片
蛋白酶 PBS H2O2 树胶 二甲苯 乙醇 特异性一抗 N-Histofine 复合物
滴管 玻片
步骤
1. 4 μm 常规石蜡切片经烤片后，常规二甲苯、乙醇脱蜡至水，PBS 洗 3 min×3 次。
2. 预处理组织切片（可用酶消化或 AR 或不作任何处理，依一抗质量而定）。
3. PBS 洗 3 min×3 次。
4. 0.3％ H2O2 阻断内源性过氧化物酶 15 min，PBS 洗 3 min×3 次。
5. 适当稀释特异性一抗，37℃ 孵育 1 h，PBS 洗 3 min×3 次。
6. N-Histofine 复合物（HRF 氨基酸-抗鼠或抗兔 IgG 复合物）孵育 30 min，PBS 洗 3 min×3 次。
7. 水洗，复染，常规树胶封片。
8. 结果观察。
注意事项
UIP 法缺点是多聚物中有 N 末端暴露，形成的电荷能和组织细胞发生静电吸附，可造成非特异性染色，染色时需平衡静电荷。
来源：丁香实验
