玻璃纸法

玻璃纸是一种透明的半透膜，将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面。然后将放线菌接种于玻璃纸上，经培养，放线菌在玻璃纸上生长形成菌苔。观察时，揭下玻璃纸，固定在载玻片上直接镜检。这种方法既能保持放线菌的自然生长状态，也便于观察不同生长期的形态特征。

1. 倒平板

取融化并冷至大约 50℃ 的高氏 1 号琼脂约 20 ml 倒平板，凝固待用。

2. 铺玻璃纸

以无菌操作用镊子将已灭菌（155～160℃ 干热灭菌 2 h）的玻璃纸片（似盖玻片大小）铺在培养基琼脂表面。用无菌玻璃涂棒（或接种环）将玻璃纸压平，使其紧贴在琼脂表面玻璃纸和琼脂之间不留气泡。每个平板可铺 5～10 块玻璃纸。也可用略小于平皿的大张玻璃纸代替小纸片书但观察时需要再剪成小块。

3. 接种

用接种环挑取菌种斜面培养物（孢子）在玻璃纸上划线接种。

4. 培养

将平板倒置， 28℃ 培养 3～5d。

5. 镜检

在洁净载玻片上加一小滴水，用镊子小心取下玻璃纸片。菌面朝上放在玻片的水滴上，使玻璃纸平贴在玻片上（中间勿留气泡）令先用低倍镜观察，找到适当视野后换高倍镜观察。

操作过程，勿碰动玻璃纸菌面上的培养物。