提问
提问
我要登录
|免费注册
收藏
wx-share
分享

放线菌形态观察实验

实验分类:

微生物实验

最新修订时间:

简介

放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的—类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多能形成菌丝体,紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝(简称“基丝”),基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝(简称“气丝”)并进一步分化产生孢子丝及孢子,有的放线菌只产生基丝而无气丝。在显微镜下直接观察时,气丝在上层、基丝在下层,气丝色暗,基丝较透明。孢子丝依种类的不同,有直、波曲、各种螺旋形或轮生。在油镜下观察,放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据为了观察放线菌的形态特征,人们设计了各种培养和观察方法,这些方法的主要目的是为了尽可能保持放线菌自然生长状态下的形态特征,本实验介绍其中几种常用方法。


来源:《微生物学实验(第三版)》


来源:丁香实验

操作方法

扦片法

1. 倒平板取融化并冷至大约 50 ℃ 的高氏 1 号琼脂约 20 ml 倒平板,凝固待用。2. 接种用接种环挑取菌种斜面培养物(孢子)在琼脂平板上划线接种。划线要密些,以利扦片。3. 扦片以无菌操作用镊子将灭菌的盖玻片以大约 45° 角扦入琼脂内(扦在接种线上)(图 IV-7),扦片数量可根据需要而定。4. 培养将扦片平板倒置, 28 ℃ 培养,培养时间根据观察的目的而定,通常 3~5 d。5.

玻璃纸法

1. 倒平板取融化并冷至大约 50℃ 的高氏 1 号琼脂约 20 ml 倒平板,凝固待用。2. 铺玻璃纸以无菌操作用镊子将已灭菌(155~160℃ 干热灭菌 2 h)的玻璃纸片(似盖玻片大小)铺在培养基琼脂表面。用无菌玻璃涂棒(或接种环)将玻璃纸压平,使其紧贴在琼脂表面玻璃纸和琼脂之间不留气泡。每个平板可铺 5~10 块玻璃纸。也可用略小于平皿的大张玻璃纸代替小纸片书但观察时需要再剪成小块。3.

印片法

1. 接种培养用高氏 1 号琼脂平板,常规划线接种或点种。28 ℃ 培养 4~7 d。也可用扦片法和玻璃纸法所使用的琼脂平板上的培养物,作为制片观察的材料。2. 印片用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基切下一小块,菌面朝上放在一载玻片上。另取一洁净载玻片置火焰上散热后,盖在菌苔上,轻轻按压,使培养物(气丝、孢子丝或孢子)粘附(「印」)在后一块载玻片的中央,有印迹的一面朝上,通过火焰 2~3 次

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序