原理
将放线菌接种在琼脂平板上,扦上灭菌盖玻片后培养,使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上匾观察时,轻轻取出盖玻片。置于载玻片上直接镜检。这种方法可观察到放线菌自然生长状态下的特征,而且便于观察不同生长期的形态。
材料与仪器
细黄链霉菌/青色链霉菌/弗氏链霉菌
灭菌的高氏1号琼脂 平皿 盖玻片 载玻片 接种环 镊子 显微镜
灭菌的高氏1号琼脂 平皿 盖玻片 载玻片 接种环 镊子 显微镜
步骤
1. 倒平板
取融化并冷至大约 50 ℃ 的高氏 1 号琼脂约 20 ml 倒平板,凝固待用。
2. 接种
用接种环挑取菌种斜面培养物(孢子)在琼脂平板上划线接种。划线要密些,以利扦片。
3. 扦片
以无菌操作用镊子将灭菌的盖玻片以大约 45° 角扦入琼脂内(扦在接种线上)(图 IV-7),扦片数量可根据需要而定。
4. 培养
将扦片平板倒置, 28 ℃ 培养,培养时间根据观察的目的而定,通常 3~5 d。
5. 镜检
用镊子小心拔出盖玻片,擦去背面培养物,然后将有菌的一面朝上放在载玻片上,直接镜检。
注意事项
观察时宜用略暗光线:先用低倍镜找到适当视野。再换高倍镜观察。如果用 0.1% 美蓝对培养后的盖玻片进行染色后观察,效果会更好。
常见问题
来源:丁香实验