材料与仪器
2〜4代的间质细胞
PBSA BSA：PBSA+0.5%BSA PBSA 2FB:含2%FBS的PBSA 封闭缓冲液 抗体：MAB4155F 克隆5D3抗ABCG2-FITC 或同型抗体-FITC
具有488 nm氩激光器和525 20带通滤波器的高速细胞分选仪
PBSA BSA：PBSA+0.5%BSA PBSA 2FB:含2%FBS的PBSA 封闭缓冲液 抗体：MAB4155F 克隆5D3抗ABCG2-FITC 或同型抗体-FITC
具有488 nm氩激光器和525 20带通滤波器的高速细胞分选仪
步骤
(a)胰蛋白酶消化2〜4代的细胞并计数。
(b)400g离心，10min。
(c)PBSA/BSA洗一遍。
(d)加入10μL抗体（MAB4155F、克隆5D3抗ABCG2-FITC或同型抗体-FITC),30 min，置于冰上。
(e)用PBSA/BSA洗一遍后离心。
(f)用高压高速的细胞分选仪进行流式细胞分选术。488nm的氩激光发生器用于激发荧光素异硫氰酸盐，525/20带通滤波器用于测量发射光。用侧向散射对前向散射的双参数图上的门来除外细胞碎片。收集至少100000个细胞用于分析。
(g)分选出的ABCG2阳性和阴性的细胞群可以用于检测它们的集落形成率，干细胞标志性基因的表达，以及继续传代用于更进一步的研究和体内移植等。
来源：丁香实验
