用ABCG2表达特性免疫分选角膜间质干细胞

(a)胰蛋白酶消化2〜4代的细胞并计数。

(b)400g离心，10min。

(c)PBSA/BSA洗一遍。

(d)加入10μL抗体（MAB4155F、克隆5D3抗ABCG2-FITC或同型抗体-FITC),30 min，置于冰上。

(e)用PBSA/BSA洗一遍后离心。

(f)用高压高速的细胞分选仪进行流式细胞分选术。488nm的氩激光发生器用于激发荧光素异硫氰酸盐，525/20带通滤波器用于测量发射光。用侧向散射对前向散射的双参数图上的门来除外细胞碎片。收集至少100000个细胞用于分析。

(g)分选出的ABCG2阳性和阴性的细胞群可以用于检测它们的集落形成率，干细胞标志性基因的表达，以及继续传代用于更进一步的研究和体内移植等。