制备 PBAC-V2 DNA

制备 PBAC-V2 DNA

材料

试剂

琼 脂 糖（电泳级； Invitrogen 或相当的产品）

B t w n H I 限 制 酶（N e w England B i o L a b s 或相当的产品）

氯 霉 素（Sig m a-Aldrich 或相当的产品）

转化有 P B A C -V 2 重组质粒的 E . 甘油保藏菌株

乙 醇（7 0 % 和 100%)

异 丙 醇（100%)

L B 肉 汤（E M D Chemicals or equivalent)

质粒纯化试剂盒： Endo-free Plasmid M e g a Kit ( Q I A G E N 12381)

仪器

离 心 机（Sorvall R C 5B 离心机或相当的产品）带 有 S L C -1500 和 S L C -4000 转头(Sorvall 或相当的产品）

粗 纱 布（V W R 或相当的产品）

电泳胶盒（O w l 或相当的产品）

E r l e n m e y e r 锥 形 瓶（125m l 和 2L ， C o r n i n g 或相当的产品）

滤 纸（S & S 588 或 606 级 ； W h a t m a n 59728435)

落 地 摇 床（L a W i n e 或相当的产品）

医用检查乳胶手套（无粉）

Oakridge 瓶（250m l 和 1L ; Thermo-Electron 或相当的产品）

移 液 器 架（D r u m m o n d 或相当的产品）

移液器及无菌枪头（可调容量； Rainin P -20、 P -200、 P -1000 或相当的产品）

一次性移液管（5m l 、 I O m l 和 25m l 容积，无 菌 C o r n i n g 或相当的产品）

紫外分光光度计（B e c k m a n D U 8 0 0 或相当的产品）

22.用 BamHI 限制酶消化 2 ug PBAC-V2 DNA， 0 •8 % 琼脂糖胶分析限制内切核酸酶图谱（图 3)。