基本方案2 GIEMSA 显带(G显带)
最新修订时间:
材料与仪器
分裂中期染色体玻片
2XSSC NaCl 胰蛋白酶 Giemsa溶液 磷酸盐缓冲液 玻片染色缸
亮视野显微镜
2XSSC NaCl 胰蛋白酶 Giemsa溶液 磷酸盐缓冲液 玻片染色缸
亮视野显微镜
步骤
1.于室温存放染色体玻片 7~10d。
2.在盛有 60~62°C 的 2XSSC 溶液的广口瓶中孵育玻片 1.5 h,每个广口瓶中盛放玻片不超过 7 张。
3.将玻片转移至 0.9% NaCl 溶液中(室温),用新配制的 NaCl 溶液冲洗玻片并晾干。
4.将玻片在胰蛋白酶/Giemsa 溶液中染色,在将玻片放入广口瓶中之前,用棉球将染色液表面类似金属的薄膜去除,或在取出玻片之前用流动水将薄膜冲掉。
5.将所有玻片移入新配制的磷酸盐缓冲液中。
6.将每一张玻片用磷酸盐缓冲液彻底冲洗 2 次。甩去多余水分,用吹风机吹干玻片。
7.在亮视野显微镜下用 20X 物镜观察显带的染色体,在玻片上滴加镜油,在 loox 油镜下分析染色体。用绿色滤光镜可获得比较好的条带分辨率。用洁净的丙酮去除镜油后,保存玻片。
2.在盛有 60~62°C 的 2XSSC 溶液的广口瓶中孵育玻片 1.5 h,每个广口瓶中盛放玻片不超过 7 张。
3.将玻片转移至 0.9% NaCl 溶液中(室温),用新配制的 NaCl 溶液冲洗玻片并晾干。
4.将玻片在胰蛋白酶/Giemsa 溶液中染色,在将玻片放入广口瓶中之前,用棉球将染色液表面类似金属的薄膜去除,或在取出玻片之前用流动水将薄膜冲掉。
5.将所有玻片移入新配制的磷酸盐缓冲液中。
6.将每一张玻片用磷酸盐缓冲液彻底冲洗 2 次。甩去多余水分,用吹风机吹干玻片。
7.在亮视野显微镜下用 20X 物镜观察显带的染色体,在玻片上滴加镜油,在 loox 油镜下分析染色体。用绿色滤光镜可获得比较好的条带分辨率。用洁净的丙酮去除镜油后,保存玻片。
来源:丁香实验