材料与仪器
细胞
PEG1000
离心管
PEG1000
离心管
步骤
1. 从无血清培养基中沉淀杂交前体细胞。
2. 倒尽上清。
3. 用手指弹拨管底或双手搓转离心管,使细胞重新悬浮。
4. 加入 1 ml PEG1000,待 2 分钟。
5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培养基稀释 PEG。于室温,200 g 离心 5 分钟沉淀细胞。
6. 加 5 ml 含 10% FBS 的培养基,轻轻转动离心管重悬细胞,尽量不要打碎细胞,按步骤 5 重新沉淀细胞。
7. 最后一次以适量生长培养基重悬细胞,24~48 小时后加入选择培养基。
8. 筛选细胞:融合 12~24 小时后就可以进行异核体分析。
2. 倒尽上清。
3. 用手指弹拨管底或双手搓转离心管,使细胞重新悬浮。
4. 加入 1 ml PEG1000,待 2 分钟。
5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培养基稀释 PEG。于室温,200 g 离心 5 分钟沉淀细胞。
6. 加 5 ml 含 10% FBS 的培养基,轻轻转动离心管重悬细胞,尽量不要打碎细胞,按步骤 5 重新沉淀细胞。
7. 最后一次以适量生长培养基重悬细胞,24~48 小时后加入选择培养基。
8. 筛选细胞:融合 12~24 小时后就可以进行异核体分析。
来源:丁香实验