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简介
来源:丁香实验
操作方法
1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度(80% 汇合率)。 2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基,加 2 ml 50% PEG-1000,轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。 3. 往培养皿或瓶中加 5 ml 完全培养基以稀释 PEG 溶液。 4. 吸净培养皿或瓶中的液体,再加 5 ml 培养基洗涮细胞,进一步稀释 PEG。 5. 再洗一次细胞,
悬浮培养细胞的融合1. 从无血清培养基中沉淀杂交前体细胞。 2. 倒尽上清。 3. 用手指弹拨管底或双手搓转离心管,使细胞重新悬浮。 4. 加入 1 ml PEG1000,待 2 分钟。 5. 加入 5 ml 含 10% FBS 的培养基稀释 PEG。于室温,200 g 离心 5 分钟沉淀细胞。 6. 加 5 ml 含 10% FBS 的培养基,轻轻转动离心管重悬细胞,尽量不要打碎细胞,按步骤 5 重新沉