悬滴培养

未分化 ES 细胞
PBS
ES 分化培养基 移液器

1. 准备下列试剂和材料：

未分化 ES 细胞

无 Ca²⁺ 和 Mg²⁺ PBS

ES 分化培养基

8 道微量移液器

无菌多道移液器容器

2. 收获未分化 ES 细胞。

3. 在 100 mm 组织培养皿中加 10 ml PBS 备用。

4. 在一无菌容器内将 5X10⁴ 未分化 ES 细胞悬浮于 5 ml ES 分化培养基中。

5. 用多道移液器在 100 mm 组织培养皿盖的内表面加 5 排 30 μl 液滴（每滴 300 个细胞）。

6. 拿起盖，轻轻翻转，盖在内有 10 ml PBS 的培养皿上。

7. 小心将培养皿放于温箱内，孵育 2 天。