材料与仪器
未分化 ES 细胞
PBS
ES 分化培养基 移液器
PBS
ES 分化培养基 移液器
步骤
1. 准备下列试剂和材料:
未分化 ES 细胞
无 Ca2+ 和 Mg2+ PBS
ES 分化培养基
8 道微量移液器
无菌多道移液器容器
2. 收获未分化 ES 细胞。
3. 在 100 mm 组织培养皿中加 10 ml PBS 备用。
4. 在一无菌容器内将 5X104 未分化 ES 细胞悬浮于 5 ml ES 分化培养基中。
5. 用多道移液器在 100 mm 组织培养皿盖的内表面加 5 排 30 μl 液滴(每滴 300 个细胞)。
6. 拿起盖,轻轻翻转,盖在内有 10 ml PBS 的培养皿上。
7. 小心将培养皿放于温箱内,孵育 2 天。
未分化 ES 细胞
无 Ca2+ 和 Mg2+ PBS
ES 分化培养基
8 道微量移液器
无菌多道移液器容器
2. 收获未分化 ES 细胞。
3. 在 100 mm 组织培养皿中加 10 ml PBS 备用。
4. 在一无菌容器内将 5X104 未分化 ES 细胞悬浮于 5 ml ES 分化培养基中。
5. 用多道移液器在 100 mm 组织培养皿盖的内表面加 5 排 30 μl 液滴(每滴 300 个细胞)。
6. 拿起盖,轻轻翻转,盖在内有 10 ml PBS 的培养皿上。
7. 小心将培养皿放于温箱内,孵育 2 天。
来源:丁香实验