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简介
本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。
来源:丁香实验
操作方法
1. 准备下列试剂和材料: 未分化 ES 细胞 无 Ca2+ 和 Mg2+ PBS ES 分化培养基 8 道微量移液器 无菌多道移液器容器 2. 收获未分化 ES 细胞。 3. 在 100 mm 组织培养皿中加 10 ml PBS 备用。 4. 在一无菌容器内将 5X104 未分化 ES 细胞悬浮于 5 ml ES 分化培养基中。 5. 用多道移液器在 100 mm 组织培养皿盖
培养皿ES细胞集落1. 准备下列试剂和材料: 悬滴培养的 ES 细胞单一胚胎样体 100 mm 细菌培养皿 ES 分化培养基 2. 在 100 mm 细菌培养皿中加 10 ml 预热的分化培养基。 3. 从温箱中取出培养 2 天的悬滴培养物。小心翻转培养皿的盖,用 10 ml 吸管收集内表面上的悬滴。 4. ES 细胞集落转移到培养皿中。 5. 单一胚胎样体孵育 3 天。
附着ES细胞分化培养1. 准备下列试剂和材料: 培养悬液中的单一胚胎样体 6 孔组织培养板 带棉塞巴斯德吸管 明胶包被的玻璃盖玻片 无菌镊子 ES 分化培养基 2. 准备明胶包被的玻璃盖玻片 3. 用无菌镊子在 6 孔组织培养板的每孔中放一块明胶包被的玻璃盖玻片。 4. 在生物安全柜中取下培养板的盖,紫外线下照射 3~5 分钟,杀死可能污染的细菌。 5. 用带棉塞巴斯德吸管把含有一个单一胚胎样体的
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