原理
在缓冲液中匀浆细胞或组织，继用超声处理。以一定量的细胞悬液与Hoechst33258混匀，测定其荧光。
材料与仪器
步骤
材料
非无菌：
缓冲液：0.05mol/LNaPO4；2.0mol/L NaCl，pH7.4 , 含 2 X l0-3 mol/L EDTA 。
Hoechst33258；缓冲液中，100ng/ml 以上的 DNA 用 lug/ml,10~100ng/ml 则用 0.lug/ml。
操作步骤
1. 在缓冲液中用 Potter 匀浆器匀浆细胞，1X 105 个细胞/ml , 1min。
2. 超声处理 30s。
3. 用 Hoechst 33258 和缓冲液按 1 : 10 稀释细胞。
4. 在 492nm，激发为 356nm 处检测荧光辐射，以小牛胸腺 DNA 作为标准。
非无菌：
缓冲液：0.05mol/LNaPO4；2.0mol/L NaCl，pH7.4 , 含 2 X l0-3 mol/L EDTA 。
Hoechst33258；缓冲液中，100ng/ml 以上的 DNA 用 lug/ml,10~100ng/ml 则用 0.lug/ml。
操作步骤
1. 在缓冲液中用 Potter 匀浆器匀浆细胞，1X 105 个细胞/ml , 1min。
2. 超声处理 30s。
3. 用 Hoechst 33258 和缓冲液按 1 : 10 稀释细胞。
4. 在 492nm，激发为 356nm 处检测荧光辐射，以小牛胸腺 DNA 作为标准。
来源：丁香实验
