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刀豆球蛋白A(ConA)凝集实验

相关实验:刀豆球蛋白A(ConA)凝集实验

最新修订时间:

原理

刀豆球蛋白属凝集素:凝集素(Lectin)是一类可结合特定糖基的蛋白质。每个凝集素分子有两个以上的结合位点。癌细胞和转化细胞所需凝集素的浓度比正常细胞低,这可能与细胞表面凝集素受体分布有关;正常细胞分散,癌细胞较集中,结合性增强。

材料与仪器

细胞
PBS ConA
振荡器 玻璃板

步骤

1.  细胞悬液制备

用pH7.4的磷酸缓冲液(PBS)制成每毫升含10×104 个细胞的悬
液;

2.  ConA PBS

用PBS配制成0.59 %的ConA液;

3.  凝集试验

向若干凹孔玻璃板凹中加细胞悬液,每凹加0.1 ml,再分别加入ConA
PBS 0.1 ml,使ConA的最终浓度依次为:100、50、25、12.5 和零(对照) μg;

4.  置微型振荡器上振荡5~10 分钟后,观察凝集现象。

5.  结果

如细胞悬液变成絮状物,说明已发生凝集;细胞凝集反应是测试细胞生物
性状的一个标志。

注意事项

如果细胞悬液变成絮状物,说明已发生凝集。

常见问题

细胞凝集反应是测试细胞生物性状的一个标志。

来源:《组织培养和分子细胞学技术》(北京出版社)

来源:丁香实验

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