原理
刀豆球蛋白属凝集素:凝集素(Lectin)是一类可结合特定糖基的蛋白质。每个凝集素分子有两个以上的结合位点。癌细胞和转化细胞所需凝集素的浓度比正常细胞低,这可能与细胞表面凝集素受体分布有关;正常细胞分散,癌细胞较集中,结合性增强。
材料与仪器
细胞
PBS ConA
振荡器 玻璃板
PBS ConA
振荡器 玻璃板
步骤
1. 细胞悬液制备
用pH7.4的磷酸缓冲液(PBS)制成每毫升含10×104 个细胞的悬液;
2. ConA PBS
用PBS配制成0.59 %的ConA液;
3. 凝集试验
向若干凹孔玻璃板凹中加细胞悬液,每凹加0.1 ml,再分别加入ConAPBS 0.1 ml,使ConA的最终浓度依次为:100、50、25、12.5 和零(对照) μg;
4. 置微型振荡器上振荡5~10 分钟后,观察凝集现象。
5. 结果
如细胞悬液变成絮状物,说明已发生凝集;细胞凝集反应是测试细胞生物性状的一个标志。
用pH7.4的磷酸缓冲液(PBS)制成每毫升含10×104 个细胞的悬液;
2. ConA PBS
用PBS配制成0.59 %的ConA液;
3. 凝集试验
向若干凹孔玻璃板凹中加细胞悬液,每凹加0.1 ml,再分别加入ConAPBS 0.1 ml,使ConA的最终浓度依次为:100、50、25、12.5 和零(对照) μg;
4. 置微型振荡器上振荡5~10 分钟后,观察凝集现象。
5. 结果
如细胞悬液变成絮状物,说明已发生凝集;细胞凝集反应是测试细胞生物性状的一个标志。
注意事项
如果细胞悬液变成絮状物,说明已发生凝集。
常见问题
细胞凝集反应是测试细胞生物性状的一个标志。
来源:《组织培养和分子细胞学技术》(北京出版社)
来源:《组织培养和分子细胞学技术》(北京出版社)
来源:丁香实验