原理
不同种乃至不同变种的生物不但外部形态有变异，由于结构基因的差别，其表达产物酶和蛋白质也必然存在着一定的差别。所以同工酶分析作为一种遗传分析手段已广泛应用于品种资源调查、杂交子代测定、种子纯度鉴定等农林业各个领域，在指导生产方面发挥了很大的作用。此外，同工酶分析对研究不同产地、不同种属生物间的亲源关系和开发利用药物植物资源方面也有积极的意义。
材料与仪器
愈创木酚
联苯胺 冰乙酸 乙酸钠 硫酸锰 过氧化氢 TMEM 过硫酸铵 琼脂
电泳仪 垂直板电泳槽 微量加样器 烧杯 试管 长滴管 平皿
联苯胺 冰乙酸 乙酸钠 硫酸锰 过氧化氢 TMEM 过硫酸铵 琼脂
电泳仪 垂直板电泳槽 微量加样器 烧杯 试管 长滴管 平皿
步骤
1.样品液制备:取材料茎部1 g加两倍冷纯净水，在冰箱预先冷却的研钵中充分研成匀浆，然后离心（3500 r/ min，20 min），加等体积甘油和少许溴酚蓝指示剂即可。
2.凝胶制备（按“常规聚丙烯酰胺凝胶电泳”），加样量40μl/孔，电压180 V，电泳时间2.5～3 h。
3.染色:0.5 g联苯胺溶于250 ml 10%冰乙酸，配成联苯胺母液。1.35 g愈创木酚溶于250 ml 10%冰乙酸，配成母液。染色液为100 ml 0.2mol/L乙酸钠溶液，10 ml 5 mmol/L硫酸锰溶液，25 ml联苯胺母液，40 ml愈创木酚母液，25 ml 0.12%过氧化氢溶液（临用前配制）。凝胶洗出后转移至染色液中，37 ℃恒温下放置30 min，显色后，置7%乙酸中保存，绘图或照相。
2.凝胶制备（按“常规聚丙烯酰胺凝胶电泳”），加样量40μl/孔，电压180 V，电泳时间2.5～3 h。
3.染色:0.5 g联苯胺溶于250 ml 10%冰乙酸，配成联苯胺母液。1.35 g愈创木酚溶于250 ml 10%冰乙酸，配成母液。染色液为100 ml 0.2mol/L乙酸钠溶液，10 ml 5 mmol/L硫酸锰溶液，25 ml联苯胺母液，40 ml愈创木酚母液，25 ml 0.12%过氧化氢溶液（临用前配制）。凝胶洗出后转移至染色液中，37 ℃恒温下放置30 min，显色后，置7%乙酸中保存，绘图或照相。
来源：丁香实验
