材料与仪器
融合蛋白
SDS 盐酸胍 CaCl2
水浴锅 培养箱 离心机
SDS 盐酸胍 CaCl2
水浴锅 培养箱 离心机
步骤
1. 将融合蛋白在≥10倍体积的20 mmol/l Tris·Cl(pH7.4)/6 mol/l 盐酸胍中透析4 h,或将盐酸胍加入融合蛋白中至终浓度为6 mol/l。
2. 将样品在100倍体积的20 mmol/l Tris·Cl(pH8.0)/1 mmol/l CaCl2透析4 h。
2. 将样品在100倍体积的20 mmol/l Tris·Cl(pH8.0)/1 mmol/l CaCl2透析4 h。
3. 更换100倍体积的新鲜缓冲液重复步骤2,继续透折4 h。
4. 按“基本方案”步骤1进行Xa因子的裂解。
来源:丁香实验