材料与仪器
抗体
SAS
透析膜 离心机
SAS
透析膜 离心机
步骤
1. 准备好一根DEAE-Affi-Gel Blue柱子。用5倍柱床体积的加样缓冲液平衡（7 ml 柱床体积/ml 抗血清或腹水）。此步骤及以下各步均在4℃下操作实施。
2. 于4℃下透析样品40 h，中间换2次加样缓冲液（每次换大约4 L）加样上柱，速度为10 ml/h。用3倍柱床体积的加样缓冲液以10 ml/h 的速度洗脱未结合的蛋白质。
3. 用洗脱缓冲液以10 ml/h 的速度洗脱结合的IgG组分，以10 ml 为一组分分部收集洗脱液，并贮存于4℃，直至合并各组分。
4. 每组分取30~50 μl，用10%SDS-PAGE在还原条件下检测组分中是否含有IgG，合并含有IgG的组分，在4℃下透析大于40 h，期间换2次缓冲液。
5. 用5倍柱床体积的加样缓冲液重新平衡DEAE-Affi-Gel Blue柱，加少许NaN3晶体， 贮存于4℃。
来源：丁香实验
