基本方案1
最新修订时间:
材料与仪器
杂交瘤
完全培养基
培养箱 转子 离心机
完全培养基
培养箱 转子 离心机
步骤
1. 将杂文瘤置于一个盛有完全DMEM-10培养基的175 cm2组织培养瓶中,置37 ℃CO2培养箱中,直至生长旺盛适于分传。
2. 按1:10的比例将细胞分传到一个新的175 cm2的培养瓶中,加入完全DMEM-10培养液到总液量为100 ml,并置CO2培养箱中直至细胞过度生长,此时溶液变酸(变黄色),细胞死亡(约5天)。
3. 将培养瓶中的内容物转移到无菌的50 ml 的锥形离心管中,室温下1 500 g 离心10 min,收集上清,弃沉淀。
4. 用ELISA法或用流式细胞仪检测MAb上清的滴度。
5. 将上清无菌保存,在4℃时通常可稳定地存放数周至数月;在-20℃时可存放数月至数年;-70℃时可永久保存。分装成数份冻存,尽量避免反复冻融。
来源:丁香实验