材料与仪器
细胞
甲硫氨酸 PBS
离心机 培养箱
甲硫氨酸 PBS
离心机 培养箱
步骤
1. 准备和用［35S］甲硫氨酸标记细胞，用0.2~1 mCi/ml 的［35S］甲疏氨酸脉冲标记细胞5~30 min。
2. 脉冲标记后，除去［35S］甲硫氨酸培养基，用10 ml 于37℃追加培养基冼细胞1次，加入10 ml 追加培养基继续培养。
3. 在37℃温育至设定时间。悬浮培养细胞在盖紧盖子的试管中旋转温育，贴附培养细胞在37℃ 5%CO2的加湿培养箱中培养。
4. 于4 ℃300 g 离心收集悬浮培养细胞，弃上清。
5. 刮下贴附培养细胞，并移入15 ml 圆锥试管，300 g 离心5 min，弃上清。用10 ml 冰冷PBS缓冲液洗1次，重复离心。
6. 处理及分析细胞。
5. 刮下贴附培养细胞，并移入15 ml 圆锥试管，300 g 离心5 min，弃上清。用10 ml 冰冷PBS缓冲液洗1次，重复离心。
6. 处理及分析细胞。
来源：丁香实验
