材料与仪器
蛋白质
Tris缓冲液 发光底物显迹液 PBS 磷酸盐
保鲜膜 摇床
Tris缓冲液 发光底物显迹液 PBS 磷酸盐
保鲜膜 摇床
步骤
1. 用50 ml 底物缓冲液洗膜两次以平衡膜,每次15 min。
2. 对于使用硝酸纤维素膜或PVDF膜进行的碱性磷酸酶反应:膜置于Nitro-Block溶液中5 min,然后以50 ml 底物缓冲液洗5 min。
3. 将膜移入显迹液中,浸泡30 s 或5 min。
4. 取出膜,滴干水份,将膜正面朝下放在一张透明的塑料保鲜膜上,向后折叠用保鲜膜将膜紧密包裹起来。
4. 取出膜,滴干水份,将膜正面朝下放在一张透明的塑料保鲜膜上,向后折叠用保鲜膜将膜紧密包裹起来。
5. 在暗房中,将膜正面朝下放在感光胶片上,曝光时间取决于样品,放射自显影几秒或过夜。
6. 如果需要,可用50 ml TBS溶液洗膜15 min,再进行发色显迹。
来源:丁香实验