材料与仪器
蛋白质
SDS 尿素
离心管 转子
SDS 尿素
离心管 转子
步骤
1. 称重后将样品加入Dounch匀浆器。每100 mg 组织加入1.5~2.0 ml SDS/或尿素/溶解缓冲液,用B号研棒冲击50次,然后以A号研棒冲击50次。
2. 放置几分钟后,取一小份样品于200 ul 离心管100 000 g 离心2 h 以上或在200 000 g 以上离心1 h。保留上清(蛋白样品)。加样于第1向凝胶上。
2. 放置几分钟后,取一小份样品于200 ul 离心管100 000 g 离心2 h 以上或在200 000 g 以上离心1 h。保留上清(蛋白样品)。加样于第1向凝胶上。
注意事项
在离心前,样品在SDS/溶解缓冲液中煮沸5 min,千万不要在尿素/溶解缓冲液中加热样品。在第1向电泳前离心样品。
来源:丁香实验