超薄凝胶的灌制和电泳
最新修订时间：
材料与仪器
蛋白质
乙醇
电泳仪 垫片 样品梳
乙醇
电泳仪 垫片 样品梳
步骤
1. 用水性实验室去污剂彻底洗擦制胶用玻璃平板，接着用热水、去离子水、95%乙酵依次冲洗，晾干。
2. 用粘胶棒在玻璃平板的底部边缘擦上一道粘痕，快速地将Gel Bond 胶片以疏水面向下放在平板上，隔着kimswipe纸巾用力压，使之固定在平板上，从Gel Bond 背面的顶部将胶片掀起，往其下的玻璃面滴上几滴水，放下胶片，用油墨滚筒将之推平。
3. 按厂商的指南组装凝胶夹层。在组装前，用气体吹去Gel Bond 表面及与其相对的玻璃平板表面的如灰尘等物质。
4. 配制和灌制分离胶和积层胶，样品梳用剪切得大小合适的供序列胶用梳子代替。积层胶在室温聚合30~45 min。
5. 制备样品和加样。
5. 制备样品和加样。
6. 电泳，每片凝胶在7 mA（胶厚0.25 mm）或14 mA（胶厚0.5 mm）恒流下电泳4~5 h。
7. 分离完成后，取出凝胶，染色前需在水流下冼去胶板上的粘性物。
7. 分离完成后，取出凝胶，染色前需在水流下冼去胶板上的粘性物。
来源：丁香实验
