原理
台盼蓝染料不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,但死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色。是最常用的检测细胞活率的方法。
材料与仪器
细胞
台盼蓝 生理盐水
显微镜 玻片 盖玻片 滴管
台盼蓝 生理盐水
显微镜 玻片 盖玻片 滴管
步骤
1. 将待染色细胞稀释至所需浓度。(方法及浓度范围与细胞计数相同)
2. 每0.1 ml 细胞悬夜约加新鲜配置的染液一小滴,室温下染3~5 min 。
3. 染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放在高倍镜下观察。
4. 死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。计数100~200个白细胞。
5. 统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活力。 细胞活力(%)=未染色的细胞数/观察的细胞总数 × 100。
注意事项
1. 染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低。
2. 另可结合细胞计数方法,同时进行细胞计数和活力检测。
来源:丁香实验