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细胞培养技术(动物胚胎作为体内抗血管生成药物筛选模型实验)

最新修订时间:

原理

在鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成早起,机体免疫系统尚未完全建立,因此对各种异物几乎不发生排除反应,便于将含药物载体置于其表面,观察各种诱导剂和抑制剂对血管生成的影响。由于其对抗血管生成药物敏感,目前仍被认为是一种较理想的药物筛选模型。

材料与仪器

种蛋
甲醛 碘酒 酒精 庆大霉素 制霉菌素
CO2培养箱

步骤

1. 将种蛋置于鸡蛋架上,在37℃、湿度为20%~50%条件下孵育3~4天,每天原位转动。

2. 用比例为1:4000的甲醛水溶液清洗种蛋外壳,空气晾干后,移至超净台内。

3. 用碘酒、酒精消毒外壳,静止5~10 min,使鸡胚处于适当的位置。

4. 碰裂蛋壳,将鸡胚释放在已消毒的。

5. 直径为100 mm 的玻璃平皿内,加入15 ml Eagle‘s培养液,分别含有100~200 u/ml 的庆大霉素和制霉素。

6. 同时,用一固定好、规格的载体如吸水海绵,把药物置于鸡胚绒毛尿囊膜上。

7. 把盛有鸡胚的平皿放在CO2孵箱内,于37℃、含1%~2%CO2条件下培养48 h。

8. 解剖显微镜下观察记录结果。

来源:丁香实验

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