细胞计数法
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原理
体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力，可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系，如随着分裂指数的不断提高，细胞也就进入了指数生长期。
分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比，它是测定细胞 周期的一个重要指标，也是不同实验研究选择细胞的重要依据。
材料与仪器
细胞
胰酶 甲醇 培养液 冰醋酸 Giemsa染液
CO2培养箱 普通显微镜 培养皿 盖玻片 吸管
胰酶 甲醇 培养液 冰醋酸 Giemsa染液
CO2培养箱 普通显微镜 培养皿 盖玻片 吸管
步骤
一、消化细胞 ，将细胞 悬液接至内含盖玻片的培养皿中。
二、CO2培养箱中培养48小时，使细胞长在盖片上。
三、取出盖片，按下列顺序操作：
PBS漂洗3分钟→甲醇：冰醋酸=3：1固定液中固定30分钟→Giemsa液染色10分钟→自来水冲洗。
四、盖片晾干后反扣在载玻片上，镜检。
五、计算
分裂指数=分裂细胞 数/总细胞 数×100%
分裂指数=分裂细胞 数/总细胞 数×100%
注意事项
操作时动作要轻，以免使盖片上的细胞脱落。
常见问题
Giemsa染液配制
称Giemsa粉末0.5 g，加几滴甘油研磨，再加入甘油（使加入的甘油总量为33 ml）。56℃中保温90-120分钟。加入33 ml甲醇，置棕色瓶中保存，此为Giemsa原液。使用时按要求用PBS稀释。一般稀释10倍。
称Giemsa粉末0.5 g，加几滴甘油研磨，再加入甘油（使加入的甘油总量为33 ml）。56℃中保温90-120分钟。加入33 ml甲醇，置棕色瓶中保存，此为Giemsa原液。使用时按要求用PBS稀释。一般稀释10倍。
来源：丁香实验
