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磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定

实验分类:

植物学实验

最新修订时间:

简介

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定是了解磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)梭化酶的功能,熟悉酶偶联法测定 PEP 稜化酶活性的方法。

原理

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定的基本原理是PEP梭化酶是 C4 植物和 CAM 植物固定 CO2 的关键酶。在 Mg2+ 存在下,PEP 梭化酶可催化 PEP 与 HCO3- 形成草酰乙酸(OAA),后者在苹果酸脱氢酶(MDH)催化下,可被 NADH 还原为苹果酸(Mal)。其反应如下:

通过在 340 nm 处测定反应体系吸光度的变化,计算出 NADH 的消耗速率,进一步推算出 PEP 梭化酶的活性。

来源:丁香实验团队

操作方法

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定是了解磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)梭化酶的功能,熟悉酶偶联法测定 PEP 稜化酶活性的方法。

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