磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定是了解磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）梭化酶的功能，熟悉酶偶联法测定 PEP 稜化酶活性的方法。

原理

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定的基本原理是PEP梭化酶是 C₄ 植物和 CAM 植物固定 CO₂ 的关键酶。在 Mg²⁺ 存在下，PEP 梭化酶可催化 PEP 与 HCO₃^- 形成草酰乙酸（OAA），后者在苹果酸脱氢酶（MDH）催化下，可被 NADH 还原为苹果酸（Mal）。其反应如下：

通过在 340 nm 处测定反应体系吸光度的变化，计算出 NADH 的消耗速率，进一步推算出 PEP 梭化酶的活性。

来源：丁香实验团队

操作方法

磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性的测定是了解磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）梭化酶的功能，熟悉酶偶联法测定 PEP 稜化酶活性的方法。

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