利用纳升级液相色谱- 串联质谱进行蛋白质鉴定实验

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

串联质谱是根据肽段的裂解规律（fragmentation pattern，也叫做 MS/MS 扫描）对肽段进行鉴定的有效技术。在串联质谱中，每一个肽片段都可以获得各自的光谱，从而可以根据肽段的特性对蛋白质进行鉴定。本实验来源「植物蛋白质组学实验指南」〔法〕H.蒂勒门特、M.齐维、C.达默韦尔、V.米琴主编。

来源：丁香实验

操作方法

利用纳升级液相色谱- 串联质谱进行蛋白质鉴定

3.1 胶内蛋白的水解和多肽的提取（一天的实验方案) 对于从 SDS-PAGE，2D-PAGE，BN-PAGE 电泳（经考马斯亮蓝 G-250 染色）得到的蛋白质 [11]，这个方案是可行、有效的。它不需要使用自动酶切仪（digestion robot) 。使用多通道移液枪和微孔板格式，一天可以处理 96 个样品。标准的方法不需要对蛋白质进行还原和烷基化反应。这两个反应步骤比较花时间，但是对大