双向电泳前去垢剂和离液剂对蛋白质的增溶作用实验

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

由于双向凝胶电泳对总蛋白具有杰出的分离能力，因此它能应用于所有类型蛋白质的分离。然而蛋白质的溶解性严重阻碍了许多种类蛋白质分析，尤其是膜蛋白的研究。本实验来源「植物蛋白质组学实验指南」〔法〕H.蒂勒门特、M.齐维、C.达默韦尔、V.米琴主编。

来源：丁香实验

操作方法

双向电泳前去垢剂和离液剂对蛋白质的增溶作用

3.1 用于 IEF 的蛋白质样品在尿素中的溶解 1. 固体样品溶解（如组织或细胞颗粒）在这种情况下，在终端溶解体积中往往忽略样品的体积。样品溶液含有尿素（终浓度 9~9.5 mol/L；见注释 1 ) ，所选取的去垢剂（依照 2.3.1 中列表）终浓度为 2% ~4% ( m/V )，两性电解质 [ IPG：0.4% (w/v )； [CA] - IEF：2% (w/v) ] ，还原剂 (