基因传递到肌肉实验

实验分类：

遗传学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

对于逆病毒转导的肌肉细胞或者D N A 疫苗肌肉都是很好的打靶位置。这两种方法我们都在这里进行描述。

来源：丁香实验

操作方法

基本方案1 小鼠肌肉原代细胞的分离和生长（没有细胞分类）

1.用断头术或者二氧化碳吸入法处死 1~5 只新生小鼠。 2.用 70% 的乙醇冲洗四肢，并用锋利的弯手术剪切下来。在立体解剖显微镜下工作，用钳状骨针将肌肉从皮肤和骨头上切下来。如果四肢都成功地切下来，将肌肉组织存放在一个的组织培养板中，滴上灭菌 PBS，确保这些累计的组织的无菌性。 3.加足够量的 PBS 保持组织湿润然后用剌刀在培养板中将其切碎成肉泥。然后加胶原蛋白酶

基本方案2 反转录酶病毒感染初级成肌细胞

[图片]

基本方案3 成肌细胞移植到骨骼肌细胞

基本方案4 对小鼠通过 quadricpeps 肌肉的肌肉注射进行 DNA 疫苗管理

1.通过腹腔注射 0.3 ml/18~20 g 总体重麻醉剂麻醉一只小鼠，使用 26 G 针头的 1ml 注射器。这将使小鼠麻醉 15~20 min。 2.用 28G 针头的 0.3 ml 注射器装人足够的 DNA 疫苗进行免疫（一般 50ul/腿，100ul/鼠)。 3.将小鼠背朝下头抬高（腾出地方可以抓住它颈部的皮肤），刮去四头肌上的毛。 4.用一只手抓