家兔有机磷中毒和解救以及有机磷及解毒剂对蟾蜍离体坐骨神经腓肠肌标本的作用实验

药学

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验目的是掌握蟾蜍离体坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。掌握家兔有机磷酸酯类的中毒症状及阿托品和解磷啶的解救作用。掌握胆碱酯酶活力的测定方法，以及用不同药解救后胆碱酯酶活力的变化规律。掌握实验标本在中毒前后及用不同药解救胆碱酯酶活力的变化规律。熟悉电子刺激器的使用方法以及了解胆碱酯酶活力测定时的基本反应过程。

来源：丁香实验

操作方法

酶法

1. 取家兔2只，称重，观察并记录活动情况、呼吸（频率，有无呼吸困难，呼吸道有无分泌等）、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌张力及有无肌震颤等。 2.为采血方便，向家兔耳缘静脉注射1%肝素0.5ml/kg。 3. 用酒精棉球擦拭兔耳外缘静脉或沿静脉走行拔毛，使其充血明显，用刀横向切开中段耳缘静脉，使血液(0.5～1.0ml)自然流入采血杯中，并轻轻振荡采血杯，防止凝血。依上述方法取甲乙两兔耳静脉血

Hestrin法

1. 取中试管加磷酸缓冲液0.85ml，血样0.15ml,置于37±1 ℃的水浴中预热3～5分钟。 2. 加入7×10-3mol/LAch溶液1.0ml，于37±１℃的水浴中反应40分钟(若反应不充分,可继续反应20分钟),每隔10分钟振摇一次。 3. 反应40分钟后立即加入碱性羟胺（lmol/LNH2OH·HCl与3.5 NNaOH溶液在用前20分钟等容混合，并不时振荡）4.0ml。 4.

电刺激法

1. 制备标本 ⑴破坏脑和脊髓取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。左手握住蟾蜍，并以食指压住其头部，使之前俯，右手持探针从枕骨大孔处皮肤垂直刺入。刺入后先将探针向前刺入颅腔左右搅动以捣毁脑组织，然后将探针抽回原处，再向后刺入椎管以捣毁脊髓。脑和脊髓完全破坏的标志是动物的四肢松软，呼吸消失。 ⑵剪除躯干上部及内脏完成上一部后，在蟾蜍骶髂关节水平之上0.5～1.0 cm处用粗剪刀横断脊柱。然后用左手握住