原理
乙酰胆碱在血液中被胆碱酯酶水解，产生醋酸和胆碱。在一定条件下，水解乙酰胆碱的量与胆碱酯酶的活性成正比，故在反应体系中，加入过量的乙酰胆碱使之参加反应， 通过测定剩余的乙酰胆碱量即可计算出被水解的量，从而推算出胆碱酯酶的活性。乙酶胆碱呈色反应：乙酰胆碱可与羟胺作用生成乙酰羟肟酸，后者在酸性条件下与 三价铁离子形成褐色的羟肟酸铁络合物，其颜色的深浅可反映乙酰胆碱含量的多少
材料与仪器
步骤
1. 取中试管加磷酸缓冲液 0.85 ml，血样 0.15 ml,置于 37±1 ℃的水浴中预热 3～5分钟。
2. 加入 7×10-3 mol/LAch 溶液 1.0 ml，于 37±１℃的水浴中反应 40 分钟 ( 若反应不充分,可继续反应 20 分钟 ) , 每隔 10 分钟振摇一次。
3. 反应 40 分钟后立即加入碱性羟胺（l mol / L NH2OH·HCl 与 3.5 N NaOH 溶液在 用前 20 分钟等容混合，并不时振荡）4.0 ml。
4. 依次加入 4 N HCl 和 3.7×10-2 mol/L FeCl3各 2 ml,每加一种试剂都要充分振荡。
5. 上述反应液用滤纸过滤，将滤液倒入 1.0 ml 的比色杯中，以 530 nm 的波长比色。
6. 对照管
⑴对照管 1：为无血、无 Ach 的其他试剂空白对照。
⑵对照管 2：为全血及试剂的空白对照，无 Ach。
⑶对照管 3（标准 Ach 值）：为反应系中全量 Ach 的对照：对照管的操作 步骤与样品管相同。
【计算】全血胆碱酯酶活性值以 0.15 ml 全血在 40 分钟内水解 Ach 的μmol 来表示（μmol Ach / 0.15 ml / 40 分钟）。
1. 酶活性值的计算
A1，A2，A3 和 A 样本 分别为对照管 1、2、3 和样品管的光密度值。A3－A1 为单纯 Ach 全量的光密度值,A2-A1 为血液的光密度值,A3+(A2－A1)为 Ach、 血液和试剂的光密度， A3+(A2－A1)－A 样本为分解的 Ach 的光密度值。
2. 酶活性值的百分数计算 样本全血胆碱酯酶活性值
2. 加入 7×10-3 mol/LAch 溶液 1.0 ml，于 37±１℃的水浴中反应 40 分钟 ( 若反应不充分,可继续反应 20 分钟 ) , 每隔 10 分钟振摇一次。
3. 反应 40 分钟后立即加入碱性羟胺（l mol / L NH2OH·HCl 与 3.5 N NaOH 溶液在 用前 20 分钟等容混合，并不时振荡）4.0 ml。
4. 依次加入 4 N HCl 和 3.7×10-2 mol/L FeCl3各 2 ml,每加一种试剂都要充分振荡。
5. 上述反应液用滤纸过滤，将滤液倒入 1.0 ml 的比色杯中，以 530 nm 的波长比色。
6. 对照管
⑴对照管 1：为无血、无 Ach 的其他试剂空白对照。
⑵对照管 2：为全血及试剂的空白对照，无 Ach。
⑶对照管 3（标准 Ach 值）：为反应系中全量 Ach 的对照：对照管的操作 步骤与样品管相同。
【计算】全血胆碱酯酶活性值以 0.15 ml 全血在 40 分钟内水解 Ach 的μmol 来表示（μmol Ach / 0.15 ml / 40 分钟）。
1. 酶活性值的计算
A1，A2，A3 和 A 样本 分别为对照管 1、2、3 和样品管的光密度值。A3－A1 为单纯 Ach 全量的光密度值,A2-A1 为血液的光密度值,A3+(A2－A1)为 Ach、 血液和试剂的光密度， A3+(A2－A1)－A 样本为分解的 Ach 的光密度值。
2. 酶活性值的百分数计算 样本全血胆碱酯酶活性值
来源：丁香实验
