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简介
原理
姐妹染色单体交换实验的基本原理是 5-溴脱氧尿嘧啶核苷酸(5-homodeoxyuridine,5-BrdU)是脱氧胸腺嘧啶核苷的类似物。
当人体外周血淋巴细胞在含有 5-BrdU 的培养液中增殖时,5-BrdU 可取代胸腺嘧啶掺入到新复制成的 DNA 子链中。经过两个复制周期后,其中期染色体的两个单体的 DNA 双链在化学组成上便出现了差别,即一条 DNA 的双链均有 BrdU 掺入,而另一条 DNA 双链中仅有一条链有 BrdU 掺入。
利用特殊的分化染色技术对染色体标本进行处理,可使双链均含有 BrdU 掺入的染色单体浅染,而只有一条链掺入 BrdU 的染色单体深染。所以当姐妹染色单体之间存在同源片段交换时,在互换处可见界限明显、颜色深浅对称的交换片段。
来源:丁香实验团队
操作方法
姐妹染色单体交换(sister chromatid exchange,SCE)是指同一条染色体复制过程中形成的两条染色单体之间所发生的一类特殊的同源重组。SCE 发生的机制尚不清楚,但其发生的频率可以反映细胞在 DNA 合成期的受损程度。